Генетическое установление отцовства/материнства

ПДАФ-анализ STR-локусов ДНК.

Типирование полиморфных STR-локусов хромосомной ДНК проводят с помощью полимеразной цепной реакции с использованием энзиматической амплификации 25-локусной панели VeriFiler™ Express PCR Amplification Kit (ThermoFisher Scientific, США), руководствуясь методическими указаниями №98/253 "Использование индивидуализирующих систем на основе полиморфизма длины амплифицированных фрагментов (ПДАФ) ДНК в судебно-медицинской экспертизе идентификации личности и установления родства" (утверждены Минздравом РФ 19.01.1999 г.) и инструкциями фирмы-изготовителя. Выявленные аллели исследованных локусов обозначаются в соответствии со стандартной международной номенклатурой, что позволяет при необходимости проводить межлабораторные сравнения полученных результатов.

При определении материнства - возможны два варианта результата анализа: (1) "исключение материнства" и (2) "неисключение материнства". Вероятность при "неисключении материнства" - 99,9999% и выше (точность 100% при "неисключении материнства" теоретически недостижима). Вероятность при исключении материнства составляет 100%. Использование образца биологического отца значительно повышает точность анализа. Также возможно проведение анонимного анализа, если информирование потенциально заинтересованных лиц нежелательно.

При определении отцовства - возможны два варианта результата анализа: (1) "исключение отцовства" и (2) "неисключение отцовства". Вероятность при "неисключении отцовства" - 99,9999% и выше (точность 100% при неисключении отцовства теоретически недостижима). При наличии совпадающих аллелей по всем исследованным локусам у ребенка и предполагаемого отца делается вывод о возможности получения ребенком наследственного материала от обследуемого: "неисключение" отцовства. Вероятность при исключении отцовства составляет 100%. Вывод об исключении отцовства делается, если в генотипах ребенка и предполагаемого отца отсутствуют совпадающие аллели даже по отдельным локусам. 3 участника: ребенок, безусловный родитель, предполагаемый родитель. Использование образца биологической матери (родство которой не оспаривается) значительно повышает точность анализа.

В качестве материала для проведения анализа можно использовать щечный эпителий, венозную кровь, волосы с волосяной луковицей, женская гигиеническая прокладка/тампон, жевательная резинка, зубная щетка, ногти, салфетка/ноcовой платок, окурки, сухое пятно крови, соска-пустышка, сперма, ушная сера. Из собранных биологических образцов выделяется ДНК и исследуется с помощью метода ПЦР (полимеразная цепная реакция). Срок исполнения до 10 суток. Есть возможность провести анализ анонимно.

Тестирование может проводиться в любом возрасте.

Правила наследования генетической информации

• Ребенок наследует по 2 аллели каждого аутосомного маркера (один от матери, второй от отца)
• Митохондриальная ДНК наследуется ребенком от матери
• Ребенок мужского пола наследует отцовский гаплотип по Y-хромосоме

В геноме ребенка могут присутствовать только такие аллели полиморфных локусов, которые обнаруживаются у матери и биологического отца. Поэтому если у ребенка и отца обнаруживается совпадение как минимум по одному аллелю в каждом исследуемом локусе, можно с вероятностью 99,75-99,99 % подтвердить отцовство. Для достижения такой точности исследуется от 16 до 20 различных локусов. При ответе "не является биологическим отцом" точность теста 100 %.

При анализе трех образцов (мать, ребенок, предполагаемый отец) гарантируется минимальное значение вероятности отцовства 99,9 %. В отсутствие матери (исследуются только образцы отца и ребенка) минимальное гарантированное значение несколько меньше – 99,75 %. То есть ошибка возможна лишь в одном случае из 10 000. Отрицательный ответ точен на 100 %.